Hoe te endospore vlek: 12 stappen (met foto`s)

Een endospore is een slapende vorm van de bacterie waarmee het slechte milieuomstandigheden kan overleven. De spore vlek is een differentiële vlek die wordt gebruikt om de aanwezigheid en locatie van sporen binnen bepaalde bacteriën te detecteren. Verschillende bacteriën, vooral die van het geslacht Bacillus en Clostridium, zijn bekend dat ze endosporen produceren. Endospore-kleuring wordt gebruikt voor het differentiëren en categoriseren van bacteriën. Het is ook erg belangrijk in de geneeskunde en de voedingsindustrie. Omdat ze moeilijk zijn om te vernietigen, is het noodzakelijk om te bepalen of ze aanwezig zijn in ingeblikt voedsel en dus ziekten voorkomen om kopers te beschermen.

Stappen

1. Bereid je voor op het experiment door handschoenen op te zetten, een laboratoriumjas te dragen en materialen te verzamelen. Zie dingen die je nodig hebt voor referentie. Grijp een dia en spoel het met zeep en water. Gebruik een bibbarig papier om de dia te drogen. Gebruik een zwarte sharpie om een cirkel aan de onderkant van de dia te tekenen om het gebied te identificeren waarvoor bacteriën worden gesmeerd.

Belangrijke laboratoriumveiligheidsslijtage bestaat uit beschermende brillen, gesloten toed schoenen, handschoenen en laboratoriumjas.

2. Vlam de inoculerende lus en wacht 10 seconden voordat u de lus in de pipet van bacteriën plaatst.

Maak een uitstrijkje van bacteriën op de dia. Vlam de lus opnieuw en plaats de lus op het droogrek. Flaming De lus zorgt voor eventuele bacteriën die mogelijk op de lus hebben gewoond voordat het wordt gebruikt.

Afbeelding getiteld Endospore vlek Stap 3

3. Stel een Bunsen-brander op je ring op met de ringklem en een draadgaas eroverheen.

4. Vul het blikje met leidingwater totdat het ongeveer halfvol is. Plaats de blik op de bovenkant van het draadgaas op de ringklem.

Afbeelding getiteld Endospore stain stap 5

5. Schakel de Bunsen-brander in om het water te verwarmen / koken.Laat stoom verschijnen voordat u de dia op het blik zet.Plaats de dia met smeer bovenop het blikje.

6. Plaats een stuk papieren handdoek bovenop de smeer op de dia en drenk de papieren handdoek met de malachiet groene kleurstof.

Afbeelding getiteld Endospore vlek Stap 7

7. Steam de smeer over het water gedurende 5 minuten.

Als de Malachite Green verdampt, voeg dan meer toe. Houd het papier nat.

Gebruik pincet om de dia af te zetten wanneer u klaar bent - het zal heet zijn.

8. Laat de dia afkoelen, verwijder het papier en spoel 30 seconden met water.

9. Voeg Safranin 1 minuut toe aan de dia. De plastic beker kan worden gebruikt om de overtollige kleurstof af te voeren.

Afbeelding Titel EndoSpore Stain Stap 10

10. Spoel het Safranin af met water om overtollige kleurstof te verwijderen. Blot de dia tussen blibuous paper om te drogen. Nadat de dia is gedroogd, kan het onder een microscoop worden onderzocht.

Titel afbeelding Endospore Stain Stap 11

11. Bekijk de dia. Plaats het op het podium. Voor dit type vlek kunnen de bacteriën alleen worden bekeken op de hoogste doelstelling (100x), bekend als de olie-immersielens. Deze olie verbetert het oplossen van stroom en zal het licht perfect focussen op het exemplaar.

12. Onderzoek de dia om de Enderospore te zien. De vegetatieve cel verschijnt rood / roze, terwijl de endospore zelf groen is. Sporen kunnen terminal, midden of subterminaal in de vegetatieve cel zijn.

Dingen die je nodig hebt

Geschikte bacteriën die endosporen produceren
Malachiet groen
Safranin
Microscoop-dia`s
bunsenbrander
Ringstandaard
Inoculatie lus
Draadgaas
Kan
Microscoop
Slaperig papier

Tips

Lees de aanwijzingen zorgvuldig.

Zorg ervoor dat u het uitstrijkje niet te dik maakt omdat dit complicaties zal veroorzaken bij het zien van de Enderospore.

Let op de tijd tijdens het experiment.

Waarschuwingen

Als glaswerk breekt, gooi glastware en bacteriën af via geschikte middelen. Zorg er ook voor dat u te allen tijde passende protocollenprocedures volgt met betrekking tot laboratoriumkleding en hanteringsapparatuur.

Deel in het sociale netwerk: